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耗材专区 | 应用EZsep™HLB固相萃取柱建立化妆品中丙酸氯倍他索的检测方法

更新时间:2023-10-24       点击次数:612

前言

丙酸氯倍他索是一种抗炎皮质类固醇,属于糖皮质激素中的一种,具有较强的抗炎、抗瘙痒和毛细管收缩作用,因此很多三无化妆品可能会违规添加糖皮质激素,使用初期由于强大的抗炎功能,使皮肤呈现出一种光滑洁白吹弹可破的状态,但长时间使用,就开始出现红血丝、爆痘,皮肤敏感等问题,继续使用会使皮肤情况越来越糟糕,停用皮肤情况更糟糕,最终只能求医慢慢来调整。

本文参照《GB/T 24800.2-2009 化妆品中四十一种糖皮质激素的测定》,利用EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,货号:PZ12602)对化妆品样品进行净化,再通过高效液相色谱串联质谱仪进行检测,建立了化妆品中丙酸氯倍他索的检测方法,此方法的回收率及平行性良好,适合化妆品中丙酸氯倍他索的检测。

1、实验过程

1.1 仪器与试剂  

SPE1000 全自动固相萃取系统,北京莱伯泰科仪器股份有限公司;

4500质谱系统,SCIEX公司;

E.T.氮吹浓缩仪,货号:C020017,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;

EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,货号:PZ12602),北京莱伯帕兹检测科技有限公司;

离心机,H1850,湖南湘仪实验室仪器开发有限公司;

乙腈(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;

甲醇(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司。

1.2 工作液配制

丙酸氯倍他索标准储备液:100ug/mL,溶剂为甲醇,购自坛墨质检标准物质中心;

丙酸氯倍他索标准工作液:取100μL的标准储备液于10mL的容量瓶中,用40%乙腈水溶液定容,得到浓度为1.0μg/mL的标样工作液;

移取1.0μg/mL的苯并(a)芘标准工作液0.05、0.1、0.2、0.4、0.8mL,分别置于1mL容量瓶中,用40%乙腈水溶液定容至刻度,得到浓度为0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0μg/mL的标准曲线。

1.3 实验部分

1.3.1 样品制备

准确称取化妆品样品0.2g(精确至0.01g)于15mL塑料离心管中,加入3mL饱和氯化钠溶液,涡旋混匀使样品分散,准确加入2mL乙腈,充分涡旋提取2min,5000r/min离心10min,吸出上层清液于50mL离心管中,下层氯化钠溶液用2mL乙腈重复提取1次,合并2次乙腈提取液,在提取液中准确加入40mL高纯水,混匀,加入亚铁氰化钾溶液0.2mL,混匀,加入乙酸锌溶液0.2mL,混匀,5000r/min离心10min,转移出上清液待净化。

1.3.2 固相萃取净化

EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,货号:PZ12602)依次用5mL甲醇、10mL水活化,取1.3.1待净化液上样,上样结束后用6mL10%乙腈水溶液淋洗萃取柱,再用4mL甲醇洗脱萃取柱,收集全部洗脱液,然后于E.T.氮吹浓缩仪(货号:C020017)40℃下氮气吹干,准确吸取4mL水涡旋复溶0.5min,过微孔滤膜后供LC-MS/MS测定。

1.3.3 LC-MS/MS仪器条件

色谱柱:Shim-pack Velox C18(2.7μm,2.1*100mm);

检测方式:多反应监测(MRM);

流动相:A:0.1%乙酸水,B:0.1%乙酸乙腈(梯度洗脱程序见表1);

流速:0.3mL/min;

进样量:1μL。

表1 梯度洗脱程序

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2、实验结果

 

2.1 加标回收率结果

表2 加标回收率结果

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2.2 加液色谱图

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图1 标液色谱图

2.3 加标样品色谱图

 

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图2 加标样品色谱图

3、结论

本次实验展示了使用EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,货号:PZ12602)对化妆品中丙酸氯倍他索进行净化,通过高效液相色谱串联质谱仪进行测定,该方法的加标回收率在77.8%~83.3%之间,RSD为2.6%,能够满足标准要求。说明EZsep™HLB固相萃取柱(60mg/3mL,货号:PZ12602)能很好的完成方法中的净化工作,并且结果稳定、可靠。

4、参考文献

《GB/T 24800.2-2009 化妆品中四十一种糖皮质激素的测定》