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耗材专区 | EZsep™WAX固相萃取柱应用于肉制品中合成着色剂的检测

更新时间:2024-03-28       点击次数:264

前言

GB 5009.35-2023食品中合成着色剂的测定标准将于2024-03-06起实施,本次标准修订在现有检测方法的基础上,扩充了能够检测的食品基质类型和着色剂种类,覆盖了GB 2760-2014中规定的11种合成着色剂(分别为柠檬黄、新红、菜红、蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、唾咻黄、赤藓红和酸性红),以及允许添加的所有基质大类中的25种典型基质。同时前处理方法也由聚酰胺粉变更为WAX混合型弱阴离子交换反相吸附或等效固相萃取柱。

本实验参考标准《GB 5009.35-2023 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》,使用EZsep™WAX固相萃取柱净化样品,再通过E.T.氮吹浓缩仪浓缩,高效液相色谱进行检测,建立了肉制品中合成着色剂的分析方法。

1、实验过程

1.1 仪器与试剂

LC-20AD液相色谱仪,岛津企业管理(中国)有限公司;

MPREP-SPE08手动固相萃取装置,货号:PZ0008,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;

E.T.氮吹浓缩仪,货号:C020017,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;

EZsep™WAX固相萃取柱(150mg/6mL),货号:PZ12103,北京莱伯帕兹检测科技有限公司;

冷冻离心机,GL-20G-Ⅱ,上海安亭科学仪器厂;

甲醇(色谱纯),购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;

甲酸,氨水,无水乙醇,乙酸铵,等化学品均为分析纯或以上,购自国药集团化学试剂有限公司;

 

水中11种色素混标,100μg/mL,坛墨质检科技股份有限公司。

1.2 工作液配制

取色素混合标准溶液1mL,用水稀释至10mL容量瓶中,配制成浓度为10μg/mL的色素混标中间液。

移取10μg/mL的色素混标中间液0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mL,分别用水稀释至1.0mL容量瓶中,得到浓度依次为0.2、0.5、1、2、5、10μg/mL的标准系列工作液。

1.3 实验部分

准确称取试样2.0g,置于50mL具塞离心管中,先加入20mL石油醚,涡旋1min,超声提取10min,10000r/min离心5min,弃去上清液,加入25mL乙醇氨水溶液,50℃超声提取20min,10000r/min离心10min,取上清液置于50mL容量瓶中,每次加入约5mL乙醇氨水溶液重复提取操作四次,离心后合并上清液于50mL容量瓶中,用乙醇氨水溶液定容至刻度即得提取液。准确吸取提取液10mL,50℃氮气浓缩至3mL左右,分3次共加入10mL5%甲醇水溶液溶解,作为待净化液,待净化。

将EZsep™WAX固相萃取柱(150mg/6mL,货号:PZ12103)依次用6mL甲醇、6mL水活化后,取1.3.1待净化液上样,上样结束后再依次用6mL2%甲酸水溶液、6mL甲醇淋洗固相萃取柱,之后用氮气吹干萃取柱2min,以6mL 2%氨化甲醇溶液洗脱并收集洗脱液,经E.T.氮吹浓缩仪在50℃下氮气浓缩至近干,再加0.2mL甲醇,用0.02mol/L乙酸铵稀释至2.0 mL,涡旋1min,PTFE微孔滤膜过滤,高效液相色谱测定。

1.4 LC分析

色谱柱:C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)

 

流动相:A:0.02mol/L乙酸铵溶液 B:甲醇;

流速:1.0mL/min

检测波长:415nm、520nm、610nm

进样量:10μL

表1 流动相梯度洗脱表

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2、       实验结果

表2 加标回收率结果

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图1 1.0μg/mL混标色谱图

 

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图2 样品加标色谱图

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图3 空白样品色谱图

3、结论

本实验使用EZsep™WAX固相萃取柱(150 mg/6mL,货号:PZ12103,北京莱伯帕兹检测科技有限公司)对肉制品中合成着色剂进行净化后测定,该方法的加标回收率在62.2%~95.0%之间,RSD在0.5%~3.9%之间。准确性和精密度均满足GB 5009.35-2023要求,且实验方法稳定、可靠。

4、参考文献

[1] GB 5009.35-2023 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定