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解决方案 | 固相萃取-LC-MS/MS测定牛血清中的全氟化合物

发表时间:2022-12-05      点击次数:576

前言

全氟和多氟烷基化合物(PFAS)由数千种物质组成,由于其含有极其稳定的碳氟键,使得此类物质具有很强的化学稳定性、表面活性、优良的热稳定性和疏水疏油性,被广泛应用于工业生产和生活消费领域,PFOAPFOSPFHxAPFHxS等都属于PFAS

PFAS被广泛应用于日用品、食品包装等产品,人们在日常生活中使用这些包含PAFS的消费品从而接触到该物质,大部分的PFASPFOAPFOS,不会在环境或人体内分解,长时间在生物体内存留,随着时间的推移,人体会产生诸多健康问题。

本实验参考《超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱法同时测定血清中12种全氟化合物》,利用莱伯泰科SPE 1000全自动固相萃取系统和M64高通量平行浓缩仪进行相关方法研究。

 

1、实验部分

1.1仪器与试剂

SPE 1000全自动固相萃取系统,莱伯泰科

 

 

 

M64高通量平行浓缩仪,莱伯泰科

 

 

 

液质联用仪:Exion LC+ Triple Quad4500SCIEX

10PFAS标准使用液:200ng/mL,溶剂体系为甲醇

M2PFOAM4PFOS(内标)使用液:1μg/mL,溶剂体系为甲醇

HLB固相萃取柱:30mg/1mL,莱伯泰科

 

1.2前处理过程

1.2.1样品制备

15mL离心管中分别加入500μL牛血清、内标(20ng/mL50μLpH=5.0的乙酸-乙酸铵缓冲溶液250μL,漩涡混匀后于37℃水浴4h

冷却至室温后加入500μL乙腈,漩涡混匀,然后在10000 r/min条件下离心10min,取上清液置于20mL样品瓶,按照图1所示的方法进行固相萃取实验。

 

 

血清中全氟化合物固相萃取流程

 

洗脱液在60℃条件下氮吹至近干,加入1mL 96%甲醇进行复溶,然后过0.22μm滤膜转移至样品瓶待 LC-MS/MS分析。

 

1.2.2加标样品测定

615mL离心管,分别加入500μL牛血清、内标(20ng/mL)和全氟化合物标准溶液(20ng/mL)各50μL,然后按照步骤1中的操作进行前处理,最后得到样品加标溶液待LC-MS/MS分析。

1.3LC-MS/MS测定条件

色谱柱:Shim-packVeloxC182.7μm2.1*100mm

柱温:40

进样量:10μL

流动相:A:20mmol/L乙酸铵水溶液,B:甲醇(梯度洗脱程序见表1

流速:0.30mL/min

检测方式:多反应监测(MRM),定量、定性离子对见表2

梯度洗脱程序

 

 

2目标物的MRM选择离子对

 

 

 

2、测定结果

2.1色谱图

全氟化合物标样色谱图

 

样品加标色谱图

 

 

2.2加标回收率

血清中全氟化合物经固相萃取、浓缩等前处理,LC-MS/MS检测,得到加标回收率及重复性,具体结果见表3

3 血清中全氟化合物加标回收率结果

 

总结

本文参考《超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱法同时测定血清中12种全氟化合物》中的方法,使用莱伯泰科SPE 1000全自动固相萃取系统和M64高通量平行浓缩仪,对牛血清中的10种全氟化合物进行萃取和浓缩,并用液相色谱分离,电喷雾离子源(ESI)电离,多反应监测模式(MRM)检测。从表3可以看出,牛血清中5种全氟化合物有检出,其中含量较高的为PFOAPFOS,分别为0.59μg/L0.50μg/L10种全氟化合物的加标回收率为53.6%-117.8%RSD4.9%-12.1%

莱伯泰科SPE 1000全自动固相萃取系统可实现最多八个样品同时上样,具备上样及部分上样两种上样模式,同时收集架可直接放入M64高通量平行浓缩仪中进行氮吹浓缩操作,中间无需样品转移可提高实验效率及减少目标物损失,两款仪器无本底残留且使用方法简便,适用于血清中全氟化合物的检测分析。

 

参考文献

王铮,张济明,郭剑秋,.超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱法同时测定血清中12种全氟化合物[J].环境与职业医学,2021,383:238-244,253.

 


 


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